紫外分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室中常用的分析儀器，比例雙光束紫外分光光度計(jì)因其能自動(dòng)消除光源強(qiáng)度變化帶來的誤差而備受青睞。為了確保其測量準(zhǔn)確性，定期進(jìn)行校準(zhǔn)是重要的步驟。
一、準(zhǔn)備工作
確保比例雙光束紫外分光光度計(jì)放置在平穩(wěn)的工作臺(tái)上，避免因震動(dòng)或傾斜影響測量精度。
檢查電源線是否完好，確保電源電壓與儀器額定電壓相符。
根據(jù)需要選擇合適的光譜帶寬和波長范圍。
二、光源校準(zhǔn)
打開儀器電源，預(yù)熱約20分鐘，使光源穩(wěn)定。
選擇波長校準(zhǔn)模式，通常儀器會(huì)有專門的校準(zhǔn)波長。
將標(biāo)準(zhǔn)光源接入儀器，調(diào)整光路，使光束通過校準(zhǔn)器并進(jìn)入檢測器。
觀察儀器顯示的吸光度值，并與標(biāo)準(zhǔn)光源的理論值進(jìn)行比較，如有偏差則進(jìn)行調(diào)整，直至達(dá)到校準(zhǔn)要求。
三、波長校準(zhǔn)
仍在光源穩(wěn)定的狀態(tài)下，選擇波長掃描模式。
設(shè)置掃描的起始波長和終止波長，并啟動(dòng)掃描。
觀察掃描圖譜，檢查是否有明顯的峰值或拐點(diǎn)，這些可能是波長不準(zhǔn)確的標(biāo)志。
根據(jù)需要調(diào)整波長校準(zhǔn)旋鈕，直至圖譜上的峰值或拐點(diǎn)與理論值相符。
四、吸光度校準(zhǔn)
準(zhǔn)備已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
將標(biāo)準(zhǔn)溶液置于比色皿中，并放入樣品室。
選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL，并測量標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度和測得的吸光度值，計(jì)算出儀器的吸光度校準(zhǔn)系數(shù)。
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